ELISA test: ano ang prinsipyo?

ELISA test: ano ang prinsipyo?

Kahulugan: ano ang ELISA test?

Ang linked enzyme immunoabsorption assay technique – sa English Enzyme-Linked Immuno Assay – o ELISA test ay isang immunological test na nagbibigay-daan sa pagtuklas o pagsusuri ng mga molekula sa isang biological sample. Ito ay na-konsepto at binuo ng dalawang Swedish scientist, sina Peter Perlmann at Eva Engvall sa Stockholm University noong 1971.

Ang mga molekula na sinusuri ng pamamaraang ELISA ay karaniwang mga protina. At ang mga uri ng sample ay kinabibilangan ng tuluy-tuloy na biological na materyales – plasma, serum, ihi, pawis -, cell culture media, o isang recombinant na protina – protina na ginawa ng isang cell na ang genetic na materyal ay binago ng genetic recombination – na nilinis sa solusyon.

Ang ELISA test ay pangunahing ginagamit sa immunology upang makita at/o masukat ang pagkakaroon ng mga protina, antibodies o antigens sa isang sample. Tinutukoy ng serological test na ito ang mga antibodies na ginawa ng katawan bilang tugon sa kontaminasyon ng viral.

Prinsipyo ng ELISA test para sa mga nakakahawang sakit

Ang paggamit ng mga antibodies para sa pagsusuri ng mga nakakahawang sakit ay kumakatawan sa isang tiyak at mabilis na paraan. Ang ELISA technique ay isang immuno-enzymatic technique na ginagawang posible na mailarawan, mula sa isang biological sample, ang mga reaksyon sa pagitan ng isang antigen - isang katawan na itinuturing na dayuhan ng buhay na organismo - at isang antibody gamit ang isang color reaction na ginawa ng isang enzyme marker - sa pangkalahatan ay alkaline phosphatase at peroxidase - dating nakakabit sa antibody. Kinukumpirma ng reaksyon ng kulay ang pagkakakilanlan ng nakahiwalay na bacterium o ang pagkakaroon ng nais na virus at ang intensity ng kulay ay nagbibigay ng indikasyon ng dami ng antigens o antibodies sa ibinigay na sample.

Ang iba't ibang uri ng mga pagsusulit sa ELISA

Mayroong apat na pangunahing uri ng ELISA test:

  • Direkta ni ELISA, ginagawang posible na tuklasin o sukatin ang mga antibodies. Gumagamit lamang ito ng pangunahing antibody;
  • ELISA indirect, ang pinaka-tinatanggap na ginagamit, ay ginagawang posible ring matukoy o masuri ang mga antibodies. Gumagamit ito ng pangalawang antibody na nagbibigay ng mas mahusay na sensitivity kaysa sa direktang ELISA;
  • ELISA sa kompetisyon, ay nagbibigay-daan sa dosis ng antigens. Ginawa ng kompetisyon para sa mga bono, hindi ito gumagamit ng enzyme;
  • ELISA "sa sandwich", ay nagbibigay-daan sa dosis ng antigens. Ang pamamaraan na ito ay karaniwang ginagamit sa pananaliksik.

Gamit ang ELISA test

Ang ELISA test ay ginagamit para sa:

  • Maghanap at sukatin ang mga antibodies sa serology para sa pagsusuri ng mga nakakahawang sakit: virology, parasitology, bacteriology, atbp.;
  • Dosis ng mga protina sa mababang konsentrasyon: mga tiyak na dosis ng ilang mga protina ng plasma (immunoglobulin E (IgE), ferritin, mga hormone ng protina, atbp.), mga marker ng tumor, atbp. ;
  • Mag-dosis ng maliliit na molekula: steroid hormones, thyroid hormones, gamot ...

Ang pinakakaraniwang kaso: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergy, pagbubuntis

Ang ELISA test ay ginagamit sa partikular upang masuri ang maraming mga nakakahawang sakit:

Mga sakit na nakukuha sa sekswal (STD)

Kabilang ang hepatitis, syphilis, chlamydia at HIV. Inirerekomenda ng mga awtoridad sa kalusugan, ito ang pangunahing pagsusuri sa AIDS: ipinapakita nito ang pagkakaroon ng anti-HIV antibodies at ang p24 antigen anim na linggo pagkatapos ng impeksyon.

Mga panrehiyon o endemic na sakit

Yellow fever, Marburg virus disease (MVM), Ladengue, Lyme disease, Chikungunya, Rift Valley fever, Ebola, Lassa fever, atbp.

Ang Covid-19

Upang maisagawa nang higit sa 2 hanggang 3 linggo pagkatapos ng pagsisimula ng mga sintomas, ginagawang posible ng pagsusuri sa ELISA na matukoy, sa wala pang isang oras, ang pagkakaroon ng mga anti-SARS-CoV-2 antibodies.

Mga viral pathogen na nagdudulot ng mga impeksyon sa prenatal

Toxoplasmosis, rubella, cytomegalovirus, herpes simplex halimbawa.

Iba pang mga kaso

Ngunit nakahanap din siya ng mga aplikasyon sa pagtuklas:

  • Pagbubuntis;
  • Mga sakit sa Autoimmune;
  • Food allergens: ang quantitative determination ng kabuuang immunoglobulins E (IgE) ay tumutulong sa pagtatasa at paggamot ng mga allergy;
  • Mga kaguluhan sa hormonal;
  • Mga marker ng tumor;
  • Mga virus ng halaman;
  • At marami pang iba

Ang pagiging maaasahan ng pagsubok sa Covid-19

Bilang bahagi ng pagtuklas ng mga anti-SARS-CoV-2 antibodies, isang pilot na pag-aaral na isinagawa noong Agosto 2020 ng Institut Pasteur, ang CNRS, Inserm at ang Unibersidad ng Paris ay nagpapatunay sa pagiging maaasahan ng ELISA test: parehong ELISA tests ang nasubok na paggamit ang buong N protein ng SARS-CoV-2 (ELISA N) o ang extracellular domain ng virus spike (S) bilang mga target na antigens. Ang pamamaraan na ito ay magiging posible upang makilala ang mga antibodies sa higit sa 90% ng mga kaso, na may napakababang false-positive rate na 1%.

Presyo at reimbursement ng ELISA test

Isinasagawa sa mga laboratoryo ng pagsusuri sa medikal na reseta, ang mga pagsusuri sa Elisa ay nagkakahalaga ng humigit-kumulang 10 euros at binabayaran ng 100% ng Health Insurance.

Isinasagawa sa libreng impormasyon, screening at diagnostic centers (CeGIDD), maaari silang maging libre para sa HIV at SARS-CoV-2.

Mag-iwan ng Sagot